Multispecies oral biofilm and identification of components as treatment target.

Endodontic infections involve a multispecies biofilm, making it difficult to choose an antimicrobial treatment. Characteristics such as the pathogens involved and number of microorganisms, nutrients, material surface to develop the biofilm, flow and oxygenation conditions are important for biofilm development using in vitro models. OBJECTIVE: To develop a standardized biofilm model, which replicates the main features (chemical, microbiological, and topographical) of an infected root canal tooth to detect components as treatment target. DESIGN: Clinical strains of Enterococcus faecalis, Candida albicans, and Actinomyces israelii were isolated, and a multispecies biofilm was developed using continuous laminar flow reactors under anaerobic conditions in human dental roots. The microbiological composition was determined by counting colony-forming units and scanning electron microscope micrographs. In addition, the chemical composition of the exopolymeric matrix was determined by vibrational Raman spectroscopy and liquid chromatography of biofilm supernatant treated with enzyme. RESULTS: E. faecalis turned out to be the main microorganism in mature biofilm, this was related to the presence of ß-galactosidase detected by vibrational Raman spectroscopy. After the enzymatic treatment of the extracellular polymeric substance, the presence of mannose and glucose was established. CONCLUSIONS: The present work contributes to better understanding of standard conditions to develop a multispecies biofilm in human dental roots, which could have an impact on the generation of new root canal disinfection techniques in endodontic pathologies.

Análisis bidimensional de la permeabilidad de vías aéreas con el tamaño de senos maxilares y su relación con el desarrollo de la clase esqueletal en una población mexicana / Two-dimensional analysis of airway permeability with maxillary sinus size and its relationship with the development of skeletal class in a Mexican population

Comparar la permeabilidad de las vías aéreas y el tamaño de los senos maxilares en relación con la clase esqueletal. se midieron 90 radiografías lateral de cráneo, divididas en 3 grupos, comparando las 3 clases esqueletales, las cuales se determinaron con la medida ANB de Steiner, y estas a su vez en dos subgrupos que fueron hombres y mujeres, en las cuales se utilizó el análisis de McNamara para el análisis de vías aéreas y para el área del seno maxilar se tomaron dos medidas una antero-posterior y cefálica-caudal. Al comparar los hombres con las mujeres se identificó significancia estadística en vía área superior de clase II (p=≤0.017), vía aérea inferior de clase III (p=≤0.006). Al comparar las clases esqueletales en hombres se identificó diferencias en la vía aérea superior en las clases I vs III (p=≤0.05), inferior en la clase I vs III (p=≤0,001) y II vs III (p=≤0.044). Con respecto a mujeres se identificó significancia en la vía aérea superior al comparar la clase I vs II (p=≤0,043), vía aérea inferior en la clase II vs III (p=≤0.05), longitud del seno maxilar al comparar clase I vs II (p=≤0.017). Entre la clase I esqueletal y la clase II, el tamaño de los senos maxilares resulto menor en longitud en las mujeres de clase II esqueletal. Entre la clase I y clase III esqueletal en hombres, se encontró una longitud menor en la vía aérea superior e inferior en la clase I. Las vías aéreas resultaron en menor tamaño en sujetos de clase II.

SUMMARY: To compare the airway permeability and the size of the maxillary sinuses in relation to the skeletal class. 90 lateral skull radiographs were divided into 3 groups, comparing the 3 skeletal classes, which were determined with Steiner's ANB measurement, and these were once in two subgroups that were men and women, in any McNamara analysis was used for the analysis of airways and for the maxillary sinus area measurements were made an antero-posterior and cephalic-caudal. When comparing males with females, statistical significance was identified in the upper class II route (p=≤0,017), lower class III airway (p=≤0.006). At least skeletal classes in men, differences were identified in the upper airway in classes I vs III (p=≤0.05), lower in class I vs III (p=≤0.001) and II vs III (p=≤0.044). With respect to women, significance was identified in the upper airway when comparing class I vs II (p=≤0.043), lower airway in class II vs. III (p=≤0.05), maxillary sinus length to class I vs II (p=≤0.017). Between skeletal class I and class II, maxillary sinus size was shorter in length in skeletal class II women. Between class I and skeletal class III in men, a lower length was found in the upper and lower airways in class I. The airways were found to be smaller in class II subjects.

Use of a Cellulase from Trichoderma reesei as an Adjuvant for Enterococcus faecalis Biofilm Disruption in Combination with Antibiotics as an Alternative Treatment in Secondary Endodontic Infection.

Apical periodontitis is an inflammation leading to the injury and destruction of periradicular tissues. It is a sequence of events that starts from root canal infection, endodontic treatment, caries, or other dental interventions. Enterococcus faecalis is a ubiquitous oral pathogen that is challenging to eradicate because of biofilm formation during tooth infection. This study evaluated a hydrolase (CEL) from the fungus Trichoderma reesei combined with amoxicillin/clavulanic acid as a treatment against a clinical E. faecalis strain. Electron microscopy was used to visualize the structure modification of the extracellular polymeric substances. Biofilms were developed on human dental apices using standardized bioreactors to evaluate the antibiofilm activity of the treatment. Calcein and ethidium homodimer assays were used to evaluate the cytotoxic activity in human fibroblasts. In contrast, the human-derived monocytic cell line (THP-1) was used to evaluate the immunological response of CEL. In addition, the secretion of the pro-inflammatory cytokines IL-6 and TNF-α and the anti-inflammatory cytokine IL-10 were measured by ELISA. The results demonstrated that CEL did not induce the secretion of IL-6 and TNF-α when compared with lipopolysaccharide used as a positive control. Furthermore, the treatment combining CEL with amoxicillin/clavulanic acid showed excellent antibiofilm activity, with a 91.4% reduction in CFU on apical biofilms and a 97.6% reduction in the microcolonies. The results of this study could be used to develop a treatment to help eradicate persistent E. faecalis in apical periodontitis.

Correlation between bacterial type/bacterial quantity and bone loss detected by cone beam computed tomography (CBCT) in primary endodontic infections / Correlación entre el tipo y cantidad de bacterias y la pérdida ósea detectada por Tomografía Computarizada de Haz Cónico (CBCT) en infecciones endodóncicas primarias

Abstract Periapical lesions (PL) of endodontic origin are one of the most common pathological conditions that affect peri-radicular tissues. The main objective of this study was to evaluate the amount and species of microorganisms isolated from necrotic pulps, establish a correlation between these and the size of periapical lesions, and how the amount and species of microorganisms decreased with non-surgical root canal treatment. Twenty-seven patients with a clinical diagnosis of dental pulp necrosis and chronic periapical lesions were selected; a Cone Beam Computed Tomography (CBCT) and microbial samples of the root canal system were taken previous to a disinfection protocol, a post-instrumentation/ disinfection protocol, and a post-medication placement. Samples were processed for colony-forming unit (CFU) counting, Gram staining technique, and bacterial identification by the API-20 Strep/API-20A system. The API system identified 21 species of microorganisms in the pre-instrumentation samples, 11 species in the post-instrumentation samples, and 11 in the post-medication samples. There was a correlation coefficient of 0.598% between the initial size of the lesion and the number of bacteria, with a coefficient of determination up to 35.7%, a correlation coefficient of 0.486% and a determination coefficient of 23.6% between the size of the periapical lesion and the number of CFUs. This study contributes to the knowledge of the amount and species of microorganisms isolated and identified from necrotic pulps, establishes a correlation between the amount and species of microorganisms and the size of the periapical lesions, and shows how the decrease of microorganisms contributes to the healing of PL, corroborating the importance of an adequate disinfection protocol.

Resumen Las lesiones periapicales (LP) de origen endodóncico son la condición patológica más común que afectan los tejidos perirradiculares. El objetivo principal de este estudio es evaluar la cantidad y especie de bacterias aisladas de pulpas necróticas, correlacionar la cantidad y especies bacterianas con el tamaño de la lesión, y cómo disminuyen la cantidad y especies de microorganismos con el tratamiento de conductos. A 27 pacientes con diagnóstico de necrosis pulpar y lesión periapical crónica detectada con CBCT se les tomaron muestras microbianas del sistema de conductos antes y después del protocolo de desinfección y de la medicación intraconducto. Las muestras se procesaron para el recuento de unidades de formación de colonias (UFC), tinción de Gram e identificación mediante el sistema API-20 Strep/API-20A. Se identificaron 21 especies en las muestras pre-instrumentación, 11 en las muestras post-instrumentación y 11 en las muestras post-medicación; se observó un coeficiente de correlación del 0,598% entre el tamaño inicial de la lesión y la cantidad de bacterias, con un coeficiente de determinación hasta el 35,7%, un coeficiente de correlación del 0,486% y un coeficiente de determinación del 23,6% entre el tamaño de la lesión periapical y el número de UFCs. Este estudio contribuye al conocimiento sobre la cantidad y especies de microorganismos aislados e identificados a partir de pulpas necróticas, establece una correlación entre la cantidad y especies de microorganismos y el tamaño de las lesiones periapicales y exhibe cómo la disminución de microorganismos contribuye a la curación de LP, corroborando la importancia de un adecuado protocolo de desinfección.

Anatomical and morphological findings of the root canal of maxillary premolars and their prevalence: CBCT study in a Mexican population / Hallazgos anatómicos y morfológicos del conducto radicular de premolares maxilares y su prevalencia: estudio CBCT en una población mexicana

SUMMARY: An essential prerequisite to perform any dental procedure is a clear understanding and knowledge of dental anatomy and its possible variations. The root canal system is characterized for a complex morphology, which varies among populations, individuals in the same population and even in the same person. The aim of this study was to evaluate by CBCT the morphology, number, curvature, and length of roots of first and second maxillary premolars in a Mexican population. In this stud 1700 maxillary premolars were evaluated by CBCT scans of patients; the axial, sagittal and coronal sections were analyzed following the longitudinal axis of each tooth. As a result 51.60 % of the maxillary first premolars had a single root, 31.03 % had two roots, 16.29 % had root fusion, and 1.07 % had three roots. 22.3 % of the maxillary first premolars showed mesial curvature, 41.9 % had a distal curvature, and 35.7 % did not show any curvature; and the most prevalent configuration in maxillary first premolars was Type V. 88.9 % of the maxillary second premolars had a single root, 3.9 % had two roots, 6.9 % had root fusion, and 0.11 % had three roots; 37.59 % of the maxillary second premolars showed a mesial curvature and 62.40 % showed a distal curvature; and the most prevalent configuration in maxillary second premolars was Type I. The anatomy of the root canal system is extremely complex and has many anatomical configurations, these clinical situations must be considered previous to performing any endodontic treatment.

RESUMEN: Un requisito esencial previo a la realización de cualquier procedimiento dental es una clara comprensión y conocimiento de la anatomía dental y sus posibles variaciones. El sistema de canales radiculares se caracteriza por una morfología compleja, que varía entre poblaciones, individuos en una misma población e incluso en una misma persona. El objetivo de este estudio fue evaluar mediante CBCT la morfología, número, curvatura y longitud de raíces de primeros y segundos premolares maxilares en una población mexicana. En este estudio se evaluaron 1700 premolares maxilares mediante escaneos CBCT de pacientes; se analizaron los cortes axial, sagital y coronal siguiendo el eje longitudinal de cada diente. El 51,60 % de los primeros premolares maxilares tenían una sola raíz, el 31,03 % tenían dos raíces, el 16,29 % tenían fusión de raíces y el 1,07 % tenían tres raíces. El 22,3 % de los primeros premolares maxilares presentaban curvatura mesial, el 41,9 % presentaban curvatura distal y el 35,7 % no presentaban curvatura alguna; y la configuración más prevalente en primeros premolares maxilares fue el Tipo V. El 88,9 % de los segundos premolares maxilares tenían una sola raíz, el 3,9 % dos raíces, el 6,9 % fusión de raíces y el 0,11 % tres raíces; El 37,59 % de los segundos premolares maxilares presentaban curvatura mesial y el 62,40 % curvatura distal y la configuración más prevalente en segundos premolares maxilares fue el Tipo I. La anatomía del sistema de canales radiculares es extremadamente compleja y tiene muchas configuraciones anatómicas, estas situaciones clínicas deben ser consideradas antes de realizar cualquier tratamiento de endodoncia.

Análisis morfológico del cóndilo mandibular por tomografía computarizada de haz cónico en relación al sexo en población mexicana / Morphological analysis of the mandibular condyle by cone beam computed tomography in relation to sex in a Mexican population

RESUMEN: La articulación temporomandibular es una estructura doble y simétrica, con una compleja gama de movimientos. La morfología condilar puede variar dependiendo al sexo, edad, entre otros factores. Se analizaron 100 tomografías computarizadas de haz cónico (50 hombres y 50 mujeres) divididos en 4 grupos. Se identificó diferencias significativas entre las formas aplanadas vs ovaladas del cóndilo y a su vez se encontró diferencia entre los lados derechos vs izquierdo entre hombres y mujeres. La tomografía computada de haz cónico es un método económico y accesible mediante la exposición a bajas dosis de radiación se obtienen imágenes de alta resolución de los tejidos duros de la ATM. El análisis de la tomografía computarizada de haz cónico tiene una precisión aceptable para el diagnóstico de anomalías óseas de la ATM, componentes articulares, integridad del hueso cortical y anomalías óseas subcorticales.

SUMMARY: The temporomandibular joint is a double and symmetrical structure, whit a complex range of movements. Condylar morphology can vary depending on sex, age, among other factors. 100 cone beam computed tomography scans (50 men and 50 women) divided into 4 groups were analyzed. Significant differences were identified between the flattened vs oval forms on the condyle and, in turn a difference was found between the right vs left sides between men and women. Cone beam computed tomography analysis has acceptable accuracy for the diagnosis of TMJ bone abnormalities, articular components, cortical bone integrity and subcortical bone abnormalities.

Magnificación en la terapia endodóncica mediante el microscopio operatorio / Magnification in endodontic therapy through the operatory microscope

La microendodoncia involucra la visualización a través de un microscopio operatorio de todas las fases del tratamiento de conductos y procedimientos de cirugía apical y correctiva por parte del endodoncista. Existe sobrada evidencia acerca de las mejoras que puede aportar la magnificación al tratamiento; la literatura demuestra que la capacidad del operador mejora si su visión del campo gana claridad y precisión, ambos recursos pueden ser proporcionados por el microscopio operatorio, aunado a que posibilita diagnósticos más certeros junto con mejoras en el pronóstico, lo que permite evitar posibles complicaciones. La calidad de los tratamientos endodóncicos involucra infinidad de factores, cada uno relevante en sí mismo pero, en determinados casos, el microscopio puede significar la diferencia entre un tratamiento exitoso o un fracaso clínico. En la actualidad, se ha convertido en un tema de lo más relevante, por lo que el objetivo del presente trabajo es revisar la literatura con el fin de ayudar al entendimiento basado en evidencia científica de los criterios que determinan la relevancia del uso del microscopio en el ámbito endodóncico (AU)

Microendodontics involves the visualization through an operating microscope of all phases of root canal treatment and apical and corrective surgery procedures by the endodontist. There is plenty of evidence about the improvements that magnification can provide, the literature shows that the operator's ability improves if his vision of the field gains clarity and precision, both resources can be provided by the operating microscope, added to the fact that it enables more accurate diagnoses together with improvements in the prognosis allowing to avoid possible complications. The quality of endodontic treatments involves countless factors, each relevant in itself, but in certain cases the microscope can mean the difference between a successful treatment or a clinical failure. At present, it has become a very relevant topic, so the objective of this work is to review the literature in order to help understand the criteria that determine the relevance of the use of the microscope in the endodontic field based on scientific evidence (AU)

A comparative study of the biocompatibility of two root-end filling materials in rat connective tissue / Estudio comparativo de la biocompatibilidad de dos materiales de retro-obturación en tejido conectivo de rata

The aim of the present study was to examine the short-term biocompatibility of Endosequence Root Repair Material (ERRM) paste and white Mineral Trioxide Aggregate MTA by implanting them into polyethylene tubes in the subcutaneous connective tissue of rats. twenty five male Wistar rats, 3-4 months old, weighing 300-350 g, were used. The tubes were implanted dorsally into the subcutaneous connective tissues of the rats. Five animals were sacrificed at five examination time points: 1, 3, 5, 7 and 15 days. The connective tissues containing the implants were excised. These sections were studied qualitatively and quantitatively using a light microscope. An average value for each group was obtained by averaging the sum of all inflammatory cells counted in 10 randomly selected, separate areas. For the ERRM group: There was a significant increase in the number of inflammatory cells on days 1-3 and on days 5-7 (P ≤ 0.003 and P ≤ 0.024). In the WHITE MTA group, the mean values of the sum of the inflammatory cells during the periods 1-3 days and 5-7 days were statistically significant (P ≤ 0.001 and P ≤ 0.044, respectively) and the XILOPERCHA group: Difference was observed significant in the value of the sum of inflammatory cells during the period of 3-5 days (P ≤ 0.05). According to the results it can be concluded that both, ERRM as MTA, caused an inflammatory reaction, which decreased over time; suggesting that both materials are biocompatible; showing however the presence of a higher organization of collagen fibers around the implants of ERRM.

El objetivo del presente estudio fue evaluar la biocompatibilidad a corto plazo de Material de Reparación de la Raíz Endodóntica (MRRE) y el agregado de trióxido mineral (AgTM), implantándolos dentro de tubos de polietileno en el tejido conectivo subcutáneo de ratas. Se usaron 25 ratas Wistar macho, de 3-4 meses de edad, con peso de 300 a 350 g. Los tubos fueron implantados en el tejido conectivo subcutáneo del dorso de las ratas. Cinco animales fueron sacrificados en cada uno de los siguientes períodos de tiempo: 1, 3, 5, 7, y 15 días. El tejido conectivo con los implantes fue escindido y seccionado. Los cortes se evaluaron cualitativa y cuantitativamente mediante microscopio óptico. Se obtuvo un valor para cada grupo resultado al promediar la suma de las células inflamatorias contadas en 10 áreas separadas seleccionadas aleatoriamente. Para el grupo de MRRE; hubo un incremento significativo en la cantidad de células inflamatorias entre los días 1-3 y 5-7 (p ≤ 0,003 y p ≤ 0,024). En el grupo de AgTM blanco, los valores promedio de la suma de células inflamatorias entre los períodos 1-3 días, y 5-7 días mostraron ser estadísticamente significativos (p≤ 0,001 y p ≤ 0,044 respectivamente) y en el grupo control de Xilopercha se observó diferencia significativa entre los valores de la suma de células inflamatorias entre los períodos de 3-5 días (P ≤ 0,05). De acuerdo a los resultados, puede concluirse que ambos materiales, AgTM y MRRE causaron una reacción inflamatoria que disminuyó a través del tiempo, sugiriendo que ambos materiales son biocompatibles; mostrando sin embargo una mayor organización de fibras colágenas alrededor de los implantes de MRRE.

Incidencia y tipo de istmos en primeros molares permanentes humanos, evaluación in vitro / Incidence and type of isthmus in human permanent first molars, in vitro assessment

RESUMEN: El conocimiento de la complejidad anatómica del sistema radicular de conductos generada por conductos accesorios, deltas apicales e istmos, aumenta la probabilidad de éxito en el tratamiento endodóntico, dado que dichos sitios pueden ser un reservorio de microorganismos y materia orgánica que pueden limitar la acción de los instrumentos, las sustancias irrigantes y los medicamentos intraconducto. El objetivo de este estudio fue determinar la incidencia y el tipo de istmos presentes en los distintos segmentos de raíces mesio-vestibulares de molares superiores y mesiales de molares inferiores. Se recolectaron setenta y dos primeros molares extraídos, treinta y seis superiores y treinta y seis inferiores a los cuales se les tomó radiografías y se les estudiaron distintas variantes anatómicas como número de conductos, curvatura y configuración radicular; posteriormente se les eliminó la corona y las raíces mesio-vestibulares de superiores y mesiales de inferiores se incluyeron en resina epóxica y con un disco de diamante se hicieron cortes transversales en cada raíz dejando cinco secciones de un mm iniciando desde el extremo apical hasta el cervical, se tiñeron con cristal violeta y se analizó la presencia de istmos y su clasificación bajo microscopio estereoscópico. Los resultados mostraron una alta incidencia de istmos asociada a raices de configuración aplanada. Entre más cerca del ápice, más baja la incidencia de istmo tanto en las raices mesiovestibulares del primer molar superior como en las raices mesiales del primer molar inferior; la más alta incidencia de istmos se dio aproximadamente a siete mm del ápice y la clase de istmo más frecuentemente encontrada fue la clase II en ambos tipos de raíz.

SUMMARY: The profound knowledge of the root canal anatomical complexity generated by accessory canals, apical deltas and isthmuses, increases the likelihood of success in endodontic treatment, given that such sites may be a reservoir of microorganisms and organic matter that may limit the action of instruments, irrigant substances and intracanal medications. The objective of this study was to determine the incidence and type of isthmus in the various segments of mesio-buccal roots of first upper molars and mesial root of first lower molars. Seventy-two extracted first molars, thirty-six upper and thirty-six lower were radiographed and different anatomic variants such as number of canals, curvature and root configuration were studied. Later, mesio-buccal and mesial roots were cut and embedded in resin and sectioned with a diamond disc, five serial horizontal sections were made perpendicular to the root long axis. These were stained with crystal violet and examined under stereomicroscope in order to determine the presence of isthmuses and their classification. Results showed a high incidence of isthmus associated with roots of flattened configuration. The closer to the apex, the lower the incidence of isthmus observed in both in the upper and lower roots; the isthmus were most frequently found at 7 mm from the apex, the type of isthmus found more frequently was type II in both types of root.

Análisis Morfológico del Grosor Labial en Individuos Mesofaciales y Braquifaciales en una Población Mexicana / Morphological Analysis of Lip Thickness in Mesofacial and Braquifacial Patients of a Mexican Population

El objetivo fue determinar las diferencias de grosor y proyección labial en hombres y mujeres mesofaciales y braquifaciales mexicanos a través del análisis de Arnett & Bergman. Se evaluaron 120 radiografías laterales de cráneo usando mediciones lineales y angulares de la cefalometría de tejidos blandos. Se evaluaron las dimensiones: plano oclusal, ángulo interincisal, grosor del labio superior e inferior, ángulo nasolabial, gap interlabial, proyección del labio superior e inferior, plano vertical nasion-menton. Para el análisis estadístico se realizó una prueba ANOVA usando el software minitab versión 15 para determinar las diferencias entre los grupos. No se encontraron diferencias estadísticamente significativas en el plano oclusal del incisivo superior e inferior, en el ángulo interincisal, ángulo nasolabial, gap interlabial y proyecciones de labio superior e inferior. Se encontraron diferencias estadísticamente significativas en mujeres: grosor del labio superior (p0,007), grosor del labio inferior (p0,001) y en el plano vertical nasion-menton (p0,001); mientras que para hombres se identificó diferencia significativa en: grosor del labio inferior (p0,033), proyección de labio inferior (p0,039) y en el plano vertical nasion-menton (p0,001). Estas medidas muestran que las diferencias del biotipo facial se identifican en cambios de los tejidos blandos. Existe una diferencia en el grosor de los labios entre los individuos mesofaciales y braquifaciales.

The mean of this study was to determinate the differences between lip thickness and lip projection in mesofacial and brachyfacial patients of a Mexican population using the Arnett & Bergman cephalometric analysis. 120 cephalograms were evaluated using linear and angular measurements of the soft tissue analysis. In this study it was evaluated: occlusal plane with the upper incisive, occlusal plane with the upper incisive, interincisal angle, upper and lower lip thickness, nasolabial angle, interlabial gap, upper and lower lip projection and true vertical plane from nasion-menton. The ANOVA test was performed using Minitab (15 version) statistical analysis software to indicate the differences between the groups. No statistical significance was found in the occlusal plane with the upper and lower incisive, interincisal angle, nasolabial angle, interlabial gap and upper and lower lip projection. Statistical significance was found in women: upper lip thickness (p0.007), lower lip thickness (p0.001) and true vertical plane from nasion-menton (p0.001) and a statistical significance in men: lower lip thickness (p0.033), lower lip projection (p0.039) and true vertical plane from nasion-menton (p0.001). This measurement shows soft tissue differences between the facial growth patterns. A lip thickness difference was found between mesofacial and brachyfacial individuals.

Expression of Mmp-20 in dental germs of human fetus / Expresion de Mmp-20 en gérmenes dentales de fetos humanos

During experiments in animal studies, it has been observed that enamelysin (MMP-20) is expressed during tooth development in the late secretory stage of amelogenesis but not in the mature enamel.The aim of this research was to determine the location of MMP-20 in human tooth germs in the different structures of the enamel organ.The detection of MMP-20 was performed by immunohistochemistry in 20 specimens obtained from human fetuses. Immunostaining of MMP-20 was observed from the presecretor stadium in stellate reticulum and intermediate stratum and in the basal portion of ameloblasts in the secretory stage in stellate reticulum, stratum intermedium, secretory ameloblasts, odontoblasts and dental papilla. The results of this research show the location of MMP-20 in tooth germ development in humans and provides the foundation for future research about the process of dental organ formation.

En estudios realizados en animales de experimentación se ha observado que la enamelisina (MMP-20) se expresa durante el desarrollo dental durante el estadio de secreción tardío de la amelogénesis pero no en el esmalte maduro. El objetivo de la presente investigación fue determinar la localización de MMP-20 en gérmenes dentarios humanos en las diferentes estructuras del órgano del esmalte. Se analizaron 20 especímenes obtenidos de fetos humanos, efectuando la detección de MMP-20 por Inmunohistoquímica. Se observó inmunolocalización de MMP-20 desde el estadio presecretor en retículo estrellado y estrato intermedio, así como en porción basal de ameloblastos; en el estadio secretor en retículo estrellado, estrato intermedio, ameloblastos secretores, odontoblastos y papila dental. Los resultados de la presente investigación muestran la localización de la MMP-20 en el desarrollo del germen dentario en humanos y aporta las bases para futuras investigaciones acerca del proceso de formación de los órganos dentales.

Design of a controlled release system of OP-1 and TGF-ß1 based in microparticles of sodium alginate and release characterization by HPLC-UV.

A new system for sustained release of growth factors, such as osteogenic protein 1 (OP-1) and transforming growth factor ß1 (TGF-ß1), intended to repair and promote dental tissue regeneration in rats was designed and characterized in this work. The release system was made with microparticles of sodium alginate, produced by ionic gelling dripping technique. The release profiles of OP-1 and TGF-ß1 from biopolymer matrix were determined by high-performance liquid chromatography (HPLC), and with this purpose, an HPLC-UV method was developed. About 80% of each growth factor was released in the first 24 h, reaching almost 100% in 168 h. The system was tested during the tissue repair in rat molars in comparison with calcium hydroxide and both growth factors not encapsulated. The dentin sialoprotein (DSP) was used as a repair marker. It was detected by immunohistochemistry, after 14- and 28-d post-treatment. X (2) test (p ≤ 0.001) and Fisher exact test (p ≤ 0.05) were applied for assessment of the amount of immunostaining. The treatment with encapsulated OP-1 showed an increased DSP immunostaining after 14 d and did not find any significant difference with the immunostaining observed for calcium hydroxide treatment. Treatment with TGF-ß1 did not show significant difference with calcium hydroxide. Treatment with both factors OP-1 and TGF-ß1 showed higher DSP immunostaining in comparison with calcium hydroxide treatment. In conclusion, the combination of both growth factors encapsulated showed more DSP immunostaining in comparison with each one separated, either encapsulated or not.